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大腸桿菌BL21等工業(yè)菌種可廣泛用于蛋白酶、蛋白類激素等產(chǎn)品的工業(yè)生產(chǎn),但此類菌種易受噬菌體的侵染,至今仍無理想的解決方法。
 
中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員畢昌昊、張學(xué)禮帶領(lǐng)的團隊和中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)的科研人員合作,在利用CRISPR/Cas9提高工業(yè)生產(chǎn)菌株抵御噬菌體侵染研究中取得重要進展。該研究構(gòu)建了一個靶向切割噬菌體T7基因組多個位點的可編程的CRISPR/Cas9系統(tǒng),該系統(tǒng)可提高BL21抵御噬菌體的能力。為了更好地調(diào)控CRISPR/Cas9系統(tǒng)的表達,研究人員嘗試了三種啟動子和多種誘導(dǎo)濃度,構(gòu)建的菌株BL21(pT7cas9,pT7-3gRNA,prfp)在噬菌體侵染4 h后,與對照相比,OD顯著提高,達到2.0。對受到噬菌體侵染的細胞進行計數(shù),研究人員發(fā)現(xiàn),改造過的菌株數(shù)量僅比未受到侵染的菌株數(shù)量低了一個數(shù)量級。改造過的BL21在噬菌體的侵染下,紅色熒光蛋白的表達量是未受到侵染菌株的60%。該研究通過構(gòu)建的可編程的CRISPR/Cas9系統(tǒng),顯著提高了大腸桿菌BL21抵御噬菌體侵染的能力,并且能夠持續(xù)表達蛋白。該研究為保護工業(yè)生產(chǎn)菌株大腸桿菌抵御噬菌體的侵染提供了策略。
 
相關(guān)研究成果發(fā)表在Microbial Cell Factories上,天津工生所和中國科大聯(lián)合培養(yǎng)碩士生劉麗為論文第一作者,畢昌昊與張學(xué)禮為論文的通訊作者。研究工作獲得中科院重點部署項目、國家自然科學(xué)基金的支持